毛细管电泳中的分析化学发光/化学发光检测
< 分析化学发光
毛细管电泳对极小样品具有出色的分离能力，但这对检测器提出了挑战。与其他候选方法相比，化学发光检测具有灵敏度高且设备简单、成本低廉的优势。此外，它不受分离系统中高电压的影响，而这对同样灵敏的电化学检测来说是一个特殊问题。紫外吸收检测器也具有低成本且广泛应用，但狭窄的毛细管使得难以获得足够长的光程。激光诱导荧光具有高灵敏度，但设备成本高，并且需要对非荧光分析物进行柱前或柱后衍生化。[1]
图 D11.1 – 毛细管电泳与化学发光检测之间的柱上同轴流接口（改编自参考文献 D9.1）。
与 HPLC 一样，分离所需条件与化学发光所需条件之间存在固有的兼容性问题。此外，化学发光试剂的稳定性也存在潜在问题。通过使用柱后模式而不是柱前模式来解决这两个问题。柱后接口是用于将洗脱液与化学发光试剂混合的装置，为此目的，设计可以利用合并流、同轴流或储液池混合。接口还可以根据检测位置以及是否与用于毛细管电泳的高压电源隔离，分为柱外、柱上或柱端接口。
最简单的接口，即柱外合并流，并没有得到广泛的应用。缓冲液从一个储液器流过分离毛细管，并在色谱柱末端的四通接头处与试剂合并。出口臂将混合物输送到化学发光反应线圈和紧邻光电倍增管的流通池，而第四个臂通过半透膜连接到合并点下游的第二个缓冲液储液器（包含接地电极）。这种布置将高压与检测区域隔离。
相反，柱上同轴流接口已被证明对大量应用有效。[2] 图 D11.1 显示检测器位于毛细管出口尖端，因此检测是“柱上”的。接地电极位于流出液储液器中，以便在高压区域内进行检测。分离毛细管出口同轴插入反应管，从而使湍流最小化并实现可重复的混合。