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下一代测序 (NGS)/表达量化

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RNA 测序表达量化

  • 目标:估计来自 RNA 测序样本的转录本的相对丰度。
  • 生物学问题?
  • 输入
  • 参考
  • 注释基因组 (fasta/gff)
  • 转录组 (fasta)
  • RNA 测序原始读数 (fastq, Ilumina)。
  • 输出
  • 每个转录本的相对丰度。

实验设计

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参见 (链接) RNA 测序

该方法中的典型步骤:(表格或工作流程或段落?)

  • 数据生成 | 获取一些数据。 | 测序 (链接) RNA 测序技术,
  • 获取参考 | 您需要一个包含所有相关转录本的参考,您需要这些转录本的相对丰度 |
  • RNA 测序读数 QC | 检查测序本身的质量。 |
  • 接头修剪 / 质量过滤 / 污染过滤 | 读数将包含来自转录本以外的技术来源的序列。 |
  • 比对 | 将您的读数比对到参考 |

- 量化 | 获取转录本丰度 |

工作流程

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Galaxy 工作流程

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示例工作流程

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实际工作流程

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命令行脚本

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Example workflow:
Real life workflows:
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一些工具和资源

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  • 获取参考:MetaDB (链接)基因组组装和注释 (链接)转录组从头组装 ....
  • QC:SeqWiki:FastQC、KAT
  • 修剪:SeqWiki;Trimmomatic、Sickle、Cutadapt....
  • 比对:Seqwiki:工具...... ... ... ... ... ... ... .. ....
  • Quant:Seqwiki:工具

关于该方法具体步骤的讨论和当前最佳实践

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关于这个主题/方法/什么的热门 Biostar 问题

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