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蛋白质组学/蛋白质样品制备/色谱前处理

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色谱前处理

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  • 溶解和溶液制备

对于高效液相色谱 (HPLC),样品溶液 (流动相) 不含颗粒物质非常重要。由于 HPLC 柱的敏感性以及所涉及的极端压力,这些污染物会造成极大的损害,并且蛋白质样品制备|污染物消除#污染物消除非常重要。


  • 亲和色谱的重组技术

亲和色谱是一种蛋白质分离技术,其中使用对特定蛋白质具有亲和力的底物作为色谱柱的固相。一种高度特异性的技术是使用重组技术分离从重组 DNA 表达的蛋白质。如果将基因插入克隆载体中以用于发酵大量蛋白质,则可以改变基因以在蛋白质中包含额外的氨基酸。然后,该后续序列可以用作固定相底物的结合位点。两个例子是组氨酸残基的添加,它们与某些金属离子共价结合,以及谷胱甘肽-S-转移酶蛋白的添加,它们将与谷胱甘肽结合。http://en.wikipedia.org/wiki/Affinity_chromatography

含有寡组氨酸结构域的细菌表达多肽的单步纯化。 基因。1992 年 2 月 1 日;111(1):99-104。

具有酶活性的谷胱甘肽-S-转移酶 (pGEX) 融合蛋白的溶解和纯化。 分析生化。 1993 年 4 月;210(1):179-87。

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