学校科学/氨基酸纸色谱
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这是一个关于如何使用氨基酸纸色谱(识别氨基酸)的描述。
- 演示氨基酸纸色谱分离
- 使用色谱法识别氨基酸
- 色谱槽和盖
- 色谱纸(或滤纸),适合色谱槽
- 毛细管或巴氏吸管
- 1摩尔盐酸中的氨基酸样品(刺激性)
- 未知样品(例如“未知”混合物或过滤后的果汁)
- 溶剂(BAW):丁醇:乙酸:水 60:15:25(易燃,有毒)
- 吹风机或加热托盘
- 1%丁醇中茚三酮(茚三酮)喷雾罐(易燃,有毒)
- 乳胶手套
- 通风橱
- 100℃干燥箱
BAW溶剂应在当天新鲜配制
使用铅笔,在色谱纸底部上方1.5-2厘米处轻轻画一条线。沿线以1.5厘米的间隔做上小标记。
用毛细管或吸管通过毛细作用吸取你的第一个样品。将毛细管的尖端接触第一个标记,然后拉开。你应该留下一小点(大于5毫米)湿点。让它干燥,然后再次涂抹样品。记下哪个样品放置在哪个点上(你可以在标记下方的纸上用铅笔轻轻写上)。对每个样品或混合物重复以上操作,使用不同的标记,每次使用新鲜的毛细管或吸管。让纸张干燥。
在色谱槽中加入1厘米或更少的BAW。样品点不应浸入溶剂中。将色谱槽放在阴凉处,避免阳光直射。将色谱纸竖立在色谱槽中,使底部边缘浸入溶剂中,但剩余的纸张不要接触色谱槽。盖上色谱槽盖,静置约1小时。
戴上手套,取出潮湿的纸,标记溶剂到达的位置。在通风橱中干燥纸张。仍在通风橱中,用丁醇中的茚三酮喷洒整个纸张。干燥纸张,并将其转移到干燥箱中,烘干1-2分钟。
标记每个出现的点的的位置。记下每个标准的颜色和Rf(或迁移距离),从而找到未知样品的氨基酸组成。
- 乙酸
- 刺激性气体。皮肤接触:用水冲洗。通风区域。
- 丁醇
- 高度易燃。移开点火源。
- 吸入有害。刺激性气体。使用通风橱。
- 1摩尔盐酸
- 刺激性,可能导致灼伤。皮肤接触:用水冲洗。洒漏:用碳酸氢钠中和。
- 茚三酮
- 刺激性。戴手套。茚三酮洒在皮肤上时,不会立即显现出来。它会慢慢地使皮肤染成紫色,甚至似乎可以穿透手套。经常洗手以去除它。
- 热烘箱;也会产生丁醇气体。
- 戴上手套取出纸张,或使用镊子。通风区域。