蛋白质组学/蛋白质分离 - 色谱/阴离子交换
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虽然阴离子交换剂所涉及的树脂带正电，但阴离子交换剂之所以得名，是因为它们对阴离子的亲和力。为了有效地结合蛋白质，系统中缓冲液的pH值必须大于目标蛋白质的等电点，因为蛋白质在其等电点以上带负电。
阴离子交换剂可以分为弱型或强型。弱型交换剂上的带电基团是弱碱，由于去质子化，在高pH值下很容易失去其电荷。另一方面，强型阴离子交换剂由带电基团组成，这些基团是强碱。强型阴离子交换剂能够在可变的pH范围内保持其正电荷，而弱型阴离子交换剂往往随着pH值的升高而失去其电荷。阴离子交换剂的例子包括强型阴离子交换剂Q（季铵树脂）和弱型阴离子交换剂DEAE（二乙氨基乙烷）。
通常，色谱法使用pH值在7到10之间的缓冲液进行，并从仅含有该缓冲液的溶液到含有该缓冲液和1M NaCl的溶液进行梯度洗脱(Res1)。盐（在溶液中）与固定相竞争结合，从而将蛋白质从其结合状态释放出来。蛋白质的分离是因为竞争结合所需的盐量随蛋白质外部电荷的不同而不同。阴离子交换色谱法已成功用于粗浆的纯化、蛋白质间的分离、蛋白质的浓缩以及蛋白质制剂中带负电荷的内毒素的去除(Res1)。
- Proteinchemist.com 离子交换色谱法 (IEC)
- Whatman 先进的离子交换纤维素和柱色谱