蛋白质组学/蛋白质分离 - 色谱法/阳离子交换剂
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阳离子交换剂因其吸引阳离子或带正电荷的粒子的能力而得名。在这种情况下，色谱系统的树脂带负电荷，如果缓冲液的 pH 值小于蛋白质的独特等电点，蛋白质就会结合。
与阴离子交换剂一样，阳离子交换剂也可以分为弱型和强型。弱阳离子交换剂由弱酸组成，随着 pH 值的降低，其电荷逐渐消失，而强阴离子交换剂由强酸组成，能够在较宽的 pH 值范围内保持其电荷。羧甲基常用于弱阳离子交换剂，而磺丙基则广泛用作强阳离子交换剂(Res1)
选择正确的树脂和缓冲液至关重要，因为它决定了蛋白质与树脂的结合特性。在阳离子交换中，目标蛋白质需要带正电荷才能与带负电荷的固定相结合。假设我们有一组以下蛋白质
| 蛋白质 | pI | pH 4.8 厘米 | pH 7.2 厘米 | pH 8 厘米 |
| 碳酸酐酶 | 7.0 | +16.5 | -0.4 | -2.7 |
| 羧肽酶 B | 6.2 | +12.0 | -3.3 | -6.3 |
| 胰凝乳蛋白酶 | 8.0 | +9.0 | +2.7 | 0.0 |
| 溶菌酶 | 9.8 | +14.1 | +7.9 | +6.9 |
- 在 pH 4.8 厘米时，所有蛋白质都将与阳离子交换剂结合，其中碳酸酐酶与固定相结合最牢固。如果在此 pH 值下进行洗脱，蛋白质将按胰凝乳蛋白酶、羧肽酶 B、溶菌酶和碳酸酐酶的顺序洗脱。
- 在 pH 7.2 厘米时，碳酸酐酶和羧肽酶 B 将在洗涤中洗脱（在梯度开始之前），然后是胰凝乳蛋白酶，然后是溶菌酶在盐梯度中洗脱。
- 在 pH 8 厘米时，只有溶菌酶会与固定相结合，其他三种蛋白质将在洗涤中洗脱。
还可以改变溶剂 A 和 B 中的盐浓度，以便即使带正电荷，结合较弱的蛋白质也会在洗涤中从柱子上洗脱。例如，如果您将 pH 4.8 厘米修改为在溶剂 A 中含有 0.1 M NaCl，在溶剂 B 中含有 0.2 M NaCl，您会发现结合最弱的蛋白质（胰凝乳蛋白酶）在洗涤中洗脱，而其他三种蛋白质在梯度中洗脱。
- Craig. P，罗切斯特理工学院，设计阳离子交换分离