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蛋白质组学/蛋白质分离 - 色谱/超高效液相色谱

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超高效液相色谱

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   高效液相色谱已被证明在许多科学领域非常有用,但在速度或分辨率方面受到限制。超高效液相色谱 (UHPLC) 提高了通量和分辨率,主要基于使用更小的颗粒进行分离。

   优点主要基于液相色谱的基本理论。一般而言,提高分离效率也会提高其分辨率。由于效率和最佳流速都与颗粒尺寸成反比,因此减小颗粒尺寸会提高效率和流速。

   例如,颗粒尺寸可以小至 1.7um,而 HPLC 通常使用的颗粒尺寸为 3.5um 或 5um。颗粒必须能够承受高压、极端 pH 值,并具有高负载能力以提高效率。色谱方法的其他创新包括高压溶剂输送系统,以考虑更小的颗粒尺寸,快速进样循环样品管理以及具有光纤流通池设计的专用检测器。

UHPLC 与 HPLC

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下表显示了超高效液相色谱与高效液相色谱的比较

属性 HPLC uHPLC
压力 6000 Psi 100,000 Psi
颗粒尺寸 5μm 1.7μm
流速 毫升/分钟 升/分钟
最大分辨率 相对较低 相对较高
  1. 沃特世 - 超高效液相色谱
  2. 沃特世 - 色谱实验室的 UHPLC 新边界

参考文献

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  1. Leandro CC、Hancock P、Fussell RJ、Keely BJ。比较超高效液相色谱和高效液相色谱法,通过串联四极杆质谱法测定婴儿食品中的优先农药。 J Chromatogr A。2006 年 1 月 20 日;1103(1):94-101。*
  2. Michael E. Swartz,超高效液相色谱 (UPLC):简介 www.chromatographyonline.com*
  3. Nicholas Ellor、Frances Goryki、Chung-Ping Yu 使用 UPLC 提高基于 LC/MS/MS 的生物分析测定的灵敏度和通量*
  4. Kate Yu、David Little、Rob Plumb 通过 LC/MS/MS 进行药物混合物的 HT 定量分析:比较 UPLC/MS/MS 和 HPLC/MS/MS*

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