结构生物化学/酶/双倒数图：Lineweaver Burk 图

双倒数图

双倒数方程是通过对 Michaelis-Menten 方程的两边取倒数得到的。双倒数图（也称为 Lineweaver-Burk 图）是通过将初始速度的倒数 (1/V₀) 作为底物浓度倒数 (1/[S]) 的函数绘制得到的。V_max 可以准确地确定，因此 K_M 也可以准确地确定，因为形成了一条直线。所得直线的斜率为 K_M/V_max，y 轴截距为 1/V_max，x 轴截距为 -1/K_M。使用 Michaelis-Menten 方程，V_max 是一个渐近线，因此只能近似，因此 K_M（即 V_max/2）不能准确地确定。该图是确定不同抑制剂（如竞争性、非竞争性和反竞争性）的有效方法。

对于竞争性抑制剂，抑制剂与底物分子竞争结合到结合位点。因此，K_M 将会增加，而 V_max 值不会改变。这意味着两个图将具有相同的 y 轴截距，如下所示。但是新的 x 轴截距可能难以捉摸。对于这种类型的抑制剂，需要更高浓度的底物才能使一半的活性位点被占据。因此 K_M2 将大于 K_M1。这转化为 K_M1 的倒数比 K_M2 的倒数更大。但是 x 轴截距前面有负号，因此在图上它必须相对于之前的截距向右移动。为了在双倒数图上显示这一点，斜率将增加以显示竞争性抑制剂结合强度的增加。虽然斜率在抑制剂存在的情况下增加，但在抑制剂存在和不存在的情况下，y 轴截距保持不变。

对于非竞争性抑制剂，抑制剂只与酶-底物复合物结合；因此，它不会与底物竞争结合位点。因此，K_M 和 V_max 值都会下降。因此，新 V_max 的倒数值应位于轴上的更高位置，因为当分母变小时，分数会变大。新的 K_M 的倒数值将向左移动，解释与竞争性抑制剂的解释类似。为了在双倒数图上显示这一点，斜率将保持与酶没有与抑制剂结合时的相同，但 x 轴截距将减小。在有和没有非竞争性抑制剂的情况下，酶的双倒数图将是两条平行线。

对于反竞争性抑制剂，抑制剂可以在底物结合到结合位点之前与酶结合。它不必等待酶变成酶-底物复合物才能与酶结合。抑制将导致 V_max 值下降，而 K_M 不受影响。这意味着 -1/K_M 的值对于两条线保持不变，而新的 1/V_max 的值相对于之前的值更高。为了在双倒数图上显示这一点，V_max 的下降将导致 y 轴截距更高，斜率更大。

黑线表示没有抑制剂存在时速度的倒数，蓝线表示抑制剂存在时的速度的倒数。