结构生物化学/克隆用酶

修饰核酸的酶被用于合成、降解、连接和/或去除核酸的部分。克隆酶是在核酸克隆过程中重要的酶。克隆酶的活性包括连接酶、激酶、磷酸酶和RecA蛋白。

例如，DNA连接酶用于将DNA分子连接在一起。在细胞内，链的双端共价连接。当RNA引物在DNA复制过程中取代DNA时，DNA连接酶会封闭空隙。

1. 连接酶用于连接核酸片段，特别是在克隆DNA片段到载体DNA中时。

2. 磷酸酶从核酸链中去除5'-磷酸。这可以防止载体降解，从而减少背景菌落的数量，并产生底物，激酶可以在其上连接新的放射性标记磷酸。

3. 激酶在核酸上添加新的磷酸基团。这通常是为了标记核酸片段或合成制备的寡核苷酸。

4. RecA蛋白和AgarACE®酶主要用于在某些克隆过程中保护或促进核酸纯化。大肠杆菌RecA蛋白能够促进同源DNA序列的配对。AgarACE®酶是一种专利的琼脂糖裂解酶，用于从琼脂糖凝胶中收获DNA。