结构生物化学/核酸/RNA/RNA提取
RNA提取是一种从体内组织和样本中分离和纯化RNA的技术。RNA提取的方法有很多。组织细胞内存在核糖核酸酶，它会快速降解分离的RNA，从而使提取和纯化过程变得复杂。分离和纯化的RNA可用于检测基因表达、生物标志物、药物疗效等等。
文件:RNA提取.jpg 首先，使用涡旋混合器将样本组织在Trizol溶液中均质化。混合速度非常重要，因为只有在高速混合时才能将组织均质化，但是摩擦会产生热量，这可能会加速RNA降解。向细磨的混合物中加入氯仿以进行液相分离。对于每毫升Trizol试剂，加入0.2毫升氯仿。盖紧盖子，剧烈摇动混合物15秒，并在室温下孵育。在2-8℃下以不超过14,000rpm的速度离心混合物15分钟。离心后，混合物会分离成三个不同的层：下层红色的氯仿层、中间层残留的组织和脂肪层以及上层透明的水层。RNA只存在于水层中。将水层转移到另一个容器中。使用异丙醇洗涤和沉淀RNA。在每毫升Trizol试剂中加入0.5毫升异丙醇。在室温下孵育10分钟，然后在RNA洗脱板中再次离心4分钟。去除所有上清液，用乙醇再次洗涤RNA。随后用缓冲液洗涤RNA。确保擦干任何残留的酒精，因为它们会降低RNA的质量并促进RNA降解。最后一次洗涤应使用无RNase的水来洗脱分离和纯化的RNA。
1. Gottshall, Susan L., Saban Tekin, and Peter J. Hansen. "EXTRACTION AND PURIFICATION OF TOTAL RNA USING TRIzol OR TRI REAGENT." (n.d.): n. pag. Web. 15 Nov. 2012. <http://www.animal.ufl.edu/hansen/protocols/RNA_extraction.htm>.