结构生物化学/核酸/RNA/RNA 纯化

RNA 在基因表达中扮演着多种角色，从信使、催化到调节。例如，在大肠杆菌中，80% 的 RNA 是核糖体 RNA，15% 是转移 RNA，只有 5% 是信使 RNA。信使 RNA 是蛋白质合成的模板。由于 mRNA 的含量相对较少，必须进行亲和层析以纯化它。

这种技术利用了 mRNA 的结构，它在 3' 端被聚腺苷酸化以形成聚 A 尾巴。聚（A）n 可以通过氢键与互补碱基聚（T）n 配对。聚（A）区域用于通过亲和层析从其余 RNA 中选择性分离 mRNA。只有带有聚 A 的 mRNA 才能被柱中的聚 T 结合。缺乏聚 A 尾巴的 RNA 在高盐浓度下从柱中洗脱出来。mRNA 与其他 RNA 分离。然后可以通过添加低盐洗脱缓冲液将聚（A）mRNA 从柱中洗脱出来。

亲和层析对于 RNA 的纯化和 cDNA 的合成非常有用。