结构生物化学/用酒精沉淀核酸

为了浓缩 DNA 并去除合成 DNA 中的去污剂、盐和其他低分子量污染物，使用酒精沉淀法。如果存在单价阳离子以中和负电荷并允许 DNA 聚合，则核酸不会沉淀。Na 或 Cl 醋酸盐最常用于实验室中沉淀 DNA，因为它也可以用作 pH 5.2 左右的缓冲液，这提供了一种酸性环境，有利于 DNA 沉淀。当存在游离脱氧核苷酸时，将使用 NH4 醋酸盐，因为它们与 NH4 的共沉淀比与 Na 或 Cl 的共沉淀更少。在添加盐后，将添加异丙醇或乙醇以降低溶解度，这将有利于 DNA 沉淀。酒精会与水形成氢键，换句话说，会减少溶解物质的水量。此外，酒精的极化率或屏蔽相反电荷（使它们彼此远离）的能力低于水的极化率。