蛋白质组学/蛋白质分离 - 色谱法/疏水相互作用色谱法 (HIC)

反相色谱	蛋白质分离 - 色谱法	二维 (2D) 色谱法
	疏水相互作用色谱法 (HIC)

章节作者：Laura Grell 和 Alexander Butarbutar
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章节修改者：Kai Burnett 和 Dalia Ghoneim
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疏水相互作用色谱法 (HIC)

疏水相互作用色谱法是一种利用疏水性分离蛋白质的色谱技术。在这种色谱法中，苯基、辛基或丁基等疏水基团被连接到固定相柱上。通过色谱柱的蛋白质，如果其表面具有疏水性氨基酸侧链，则能够与色谱柱上的疏水基团相互作用并结合。

HIC 分离通常设计为与离子交换色谱法中使用的条件相反。在这种分离中，最初将高离子强度的缓冲液（通常为硫酸铵）施加到色谱柱。缓冲液中的盐降低了样品溶质的溶剂化，因此随着溶剂化的降低，暴露的疏水区域被介质吸附。

(Res1)。分子疏水性越强，促进结合所需的盐浓度就越低 (Res1)。为了洗脱蛋白质，逐渐降低盐浓度，以增加疏水性的顺序洗脱结合的物质。此外，也可以通过使用温和的有机修饰剂或去污剂来实现洗脱 (Res1)。

固定相被设计为与其他分子形成疏水相互作用。这些相互作用在水中太弱了。然而，在缓冲液中添加盐会导致疏水相互作用。以下列出了盐浓度增加疏水相互作用的顺序，按其增强相互作用的能力排序：

虽然反相色谱法和疏水相互作用色谱法非常相似，但反相色谱法中的配体比疏水相互作用色谱法中的配体疏水性更强。这使得疏水相互作用色谱法能够使用更温和的洗脱条件，这些条件不会像反相色谱法那样破坏样品。