结构生物化学/蛋白质/纯化/透析
外观
这种技术不可用,因为它耗时且效果不佳,不适用于大分子。因此,它不是常用的技术。
在透析中,半透膜用于根据大小分离小分子和蛋白质。透析袋由半透膜(纤维素)制成,具有小孔。袋中装满了含有蛋白质的浓缩溶液。足够小的分子可以通过膜的孔隙扩散到袋子外的缓冲液或透析液中。透析有时用于更换缓冲液。分子从高浓度区域移动到低浓度区域。当袋子与缓冲液之间的浓度水平相等时,就不会再发生净分子运动。将袋子取出并插入另一个缓冲液中,导致袋子中的浓度相对于缓冲液更高。这会导致更多的分子扩散。重复此过程数次以确保所有或大部分不需要的小分子被去除(通常在夜间进行)。一般来说,透析不是分离蛋白质的方法,而是一种用于去除小分子(如盐)的方法。在平衡状态下,不能通过膜的大分子留在透析袋内,而大部分小分子则扩散出来。
透析技术在日常生活中用于医院。透析模拟了人体器官之一肾脏的功能。它用于肾衰竭时过滤血液中的毒素和废物。肾衰竭时,体内会积累氮代谢废物(如尿素或肌酐),称为氮质血症,可以通过血液检测。当废物在血液中积累导致代谢性酸中毒,导致疾病时,患者需要进行透析。通过血样和全天尿样进行两次测试。测量血液中的两种化学物质:尿素氮水平和肌酐水平。如果发现血液中这两种化学物质含量很高,则表明肾脏不能有效地清除体内废物。某些溶质(如钾和钙)的浓度仔细校准,使其与健康血液的浓度相似。另一种溶质是碳酸氢钠,它被用作 pH 缓冲液,通过提高透析液中的溶质浓度来中和血液中发生的一些代谢性酸中毒。
尿素