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结构生物化学/蛋白质/纯化/疏水相互作用色谱

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一般信息

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疏水相互作用色谱 (HIC)(或疏水色谱)是一种分离方法,利用盐梯度(例如硫酸铵)产生蛋白质与固相支持树脂上的配体之间的疏水相互作用[1]。这种色谱法的目的是利用特定蛋白质的疏水特性,而不是它们的电荷(在离子交换色谱中使用)。因此,蛋白质的疏水性越强,它就越牢固地粘附在柱子上,洗脱过程以最不疏水的蛋白质首先从柱子上出来进行。盐梯度很重要,因为它增加了疏水相互作用并稳定了蛋白质[2]。在洗脱过程中,除了疏水性之外,其他因素仍然影响蛋白质的分离,例如离子相互作用、pH 值、温度、盐浓度、溶剂量、缓冲液条件等。这些属性也指出了 HIC 与反相色谱和亲和色谱之间的相似之处[3]。需要注意的是,HIC 的优势在于它可以针对特定蛋白质进行准备并应用于蛋白质纯化的不同方面。条件可以略微改变以将测试应用于许多其他用于纯化和研究目的的情况,尤其是在细胞研究中。

  1. 维基教科书:蛋白质组学 - 疏水相互作用色谱 [1]

参考文献

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  1. 东曹生物科学. "常见问题解答 HPLC 色谱柱 - HIC". 东曹生物科学有限公司. 检索于 2009-10-17.
  2. Khalsa, Guruatma. "色谱法". 亚利桑那州立大学. 检索于 2009-10-17.
  3. Er-El, Zvi; Shaltiel, Shmuel. "疏水色谱:用于纯化糖原合成酶". 美国国家科学院院刊. 检索于 2009-10-17.{{cite web}}: CS1 maint: 多个名称:作者列表 (link)
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